Chromatographie sur couche mince
Technique de chromatographie couramment utilisée pour séparer des composants dans un but d'analyse ou de purification. Elle comprend une phase stationnaire : une couche mince de matériel absorbant et une phase liquide (dite phase mobile ou éluant) : un solvant ou un mélange de solvants qui va entraîner les composés à séparer le long de la phase stationnaire.
Dans cette leçon, nous allons découvrir la chromatographie sur papier et sur couche mince, toutes deux utilisées dans l'application des sciences judiciaires.
La chromatographie est une technique de séparation et cette démonstration sera réalisée en utilisant des colorants alimentaires.
Avec un crayon, tracez une ligne au bas d'une bande de papier de chromatographie.
Déposez une petite goutte de colorant alimentaire rouge sur la ligne tracée et recommencez avec les colorants alimentaires vert et bleu.
Placez la bande dans un bécher avec de l'eau, assurez-vous que le niveau de l'eau n'atteigne pas les points.
Lorsque l'eau est absorbée, elle sépare les différents composants des colorants alimentaires.
Nous avons alors créé un chromatogramme.
Le papier de chromatographie est appelé la phase stationnaire car il « reste immobile ».
L'eau est appelée la phase mobile car elle « remonte » le long du papier de chromatographie.
L'idée principale est la suivante : un composant qui est plus soluble dans l'eau parcoure une plus grande distance et un composant moins soluble parcoure une distance plus courte.
Le rapport frontal (Rf ) est la distance parcourue par un composant séparé, comparée à la distance parcourue par le solvant, dans notre exemple c'est l'eau.
Rf = distance parcourue par un composant/distance parcourue par le solvant
Ces distances peuvent être mesurées à l'aide d'une règle.
Rf = distance travelled by a component / distance travelled by the solvent
Distance travelled by solvent = 6cm
Distance travelled by component A = 4cm
Distance travelled by component B = 2cm
Rf for component A = 4cm / 6cm = 0.67
Rf for component A = 2cm / 6cm = 0.33
Que nous apprend le rapport frontal sur la solubilité d'un composant séparé au cours la phase mobile ?
Mettez la vidéo en pause le temps d'y réfléchir.
Une plus grande valeur de Rf signifie que le composant est plus soluble dans le solvant.
Une plus petite valeur de Rf signifie que le composant est moins soluble dans le solvant.
Le chromatographie sur couche mince ou CCM fonctionne exactement de la même façon.
On utilise une plaque en verre couvert d'une fine couche de gel de silice ou de tout autre matériel absorbant au lieu d'un papier de chromatographie.
Cette fine couche de matériel absorbant constitue la phase stationnaire.
Tout solvant adéquat peut être utilisé comme phase mobile.
Si les composants séparés sont incolores, le chromatogramme sec peut être aspergé de ninhydrine qui peut faire virer certains composants au violet ou le chromatogramme peut être observé sous UV.
On utilise la ninhydrine pour détecter des empreintes digitales sur une scène de crime.
Ces deux méthodes de chromatographie peuvent être utilisées pour identifier et comparer, entre autres, des échantillons de drogue, d'encre, de rouge à lèvre, de salive et d'explosifs.
En conclusion, la chromatographie sur papier et la chromatographie sur couche mince sont utilisés pour séparer les composants d'un mélange en fonction de leur solubilité.
La solubilité relative des composants séparés peut être déterminée en calculant leurs rapports frontaux.
Les composants plus solubles ont un rapport frontal plus grand et les composants moins solubles ont un rapport frontal plus petit.